Набор для выяўлення антыцелаў ІФА супраць інфекцыйнага рынатрахеіту буйной рагатай жывёлы

Мадэль №: VD105E
Скароч.:IBRV Ab Elisa
Узор: сыроватка

апісанне

Спецыфікацыя

BVDV Ab Elisa

Выкарыстанне па прызначэнні: ІнфекцыйныВірус ринотрахеита буйной рагатай жывёлыНабор антыцелаў ELISA Detection Kit выкарыстоўваецца длявызначыць інфекцыйны ринотрахеитантыцелы да віруса ў сыроватцы крыві in vitro.

Узор: сыроватка

Прадастаўленыя матэрыялы:

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus Antibody ELISA Detection Kit

Працэдуры выпрабаванняў і інтэрпрэтацыя

КРОК 1 Працэдура выпрабаванняў

1.1 Падрыхтоўка прамывальнага раствора

Working канцэнтрацыі wпопельная вадкасць:Перад выкарыстаннем раствор для мыцця неабходна аднавіць да пакаёвай тэмпературы (20-25 градусаў) і раўнамерна ўзбоўтаць, каб ён стаў аднастайным. Затым развядзіце ў 20 разоў канцэнтраваны мыйны раствор вычышчанай вадой (напрыклад, 5 мл канцэнтраванага мыйнага раствора дадаюць у 95 мл вычышчанай вады), добра змяшайце, і разведзены мыйны раствор можна захоўваць пры тэмпературы 2-8 градусаў на працягу 7 дзён.

1.2 Падрыхтоўка проб

① Узялі суцэльную кроў жывёлы, цэнтрыфугавалі пры 4000 абаротаў у хвіліну на працягу 10 хвілін і сабралі супернатант. Сыроватка таксама можа згортвацца натуральным шляхам без гемолізу.

② Развядзіце сыроватку для тэставання ў 50 разоў у пласцінцы для развядзення сыроваткі (напрыклад: дадайце 3 мкл сыроваткі для тэставання ў 147 мкл разбаўляльніка ўзору).

Заўвага: адмоўны і станоўчы кантроль не трэба разводзіць

1.3 Працэдура выпрабаванняў

①Вазьміце мікрапланшэт з этыкеткай ферментаў (у залежнасці ад колькасці ўзораў, можна разабраць і выкарыстоўваць некалькі разоў), дадайце 100 мкл разведзенай сыроваткі ў мікрапланшэт з этыкеткай ферментаў, усталюйце па дзве лункі для адмоўнага і станоўчага кантролю і дадайце 100 мкл адпаведна ў рэакцыйную лунку. Акуратна падтрасіце ўзор у лунцы, выкарыстоўваючы плёнку для запячатвання пласціны, каб накрыць пласціну, і інкубуйце пры 37 градусах на працягу 30 хвілін.

②Адкрыйце герметычную плёнку пласціны, страсіце раствор у лунцы пласціны, дадайце 300 мкл вадкасці для прамывання працоўнай канцэнтрацыі ў кожную лунку, а затым выліце вадкасць з лункі. Паўтарыце апісаныя вышэй крокі 5 разоў і, нарэшце, прамакніце насуха на чыстай ўбірае паперы.

③Разведзены ферментны кан'югат: развядзіце ферментны кан'югат (80×) у 80 разоў (напрыклад: 10 мкл канцэнтрату ферментнага кан'югата + 790ul разбаўляльніка ўзору, канкрэтная неабходная колькасць разлічваецца ў адпаведнасці з колькасцю тэставых узораў), добра змяшайце і адстаўце ў бок.

④Дадайце 100 мкл ферментнага кан'югата ў кожную лунку, накрыйце пласціну і інкубуйце пры 37 градусах на працягу 30 хвілін.

⑤Прамыванне ферментнай пласціны, канкрэтная аперацыя тая ж, што і вышэй ②.

⑥Дадайце 100 мкл раствора субстрата ў кожную лунку, накрыйце пласціну і інкубуйце 10 хвілін пры тэмпературы 37 градусаў удалечыні ад святла.

КРОК 2 Інтэрпрэтацыя вынікаў

Значэнне OD450 кожнай лункі было счытана на 96-лункавым рыдэры для мікрапланшэтаў.

2.1 Праверка. Сярэдняе значэнне OD450 нм адмоўнага кантролю было <0,25, а сярэдняе значэнне OD450 нм станоўчага кантролю было больш або роўна 0,6, эксперыментальныя вынікі былі сапраўднымі. У адваротным выпадку тэст трэба паўтарыць.

2.2 Метад разліку

Для кожнага ўзору разлічыце S/P наступным чынам, выкарыстоўваючы адкарэктаваныя значэнні ўзору і кантролю:

product-554-49